技術文章
想要更好地使用核酸抽提試劑盒，來看看這些！點擊次數：795 更新時間：2023-01-16
核酸抽提試劑盒是根據C7H7Cl法構建的，能夠從樣本中提取基因組DNA的試劑盒。
C7H7Cl具有能將含有纖維素等的細胞壁中的羥基芐基化，從而破壞細胞壁的特性。
核酸抽提試劑盒的操作方法：
全套操作約需1小時，分勻漿、細胞裂解、除蛋白、DNA純化等步驟，詳細說明如下。
勻漿和細胞裂解:
使用不同的實驗材料需采用不同的勻漿步驟，具體說明如下:
【從動物組織中提取基因組DNA】
使用研缽進行勻漿時:
①取1~100 mg的動物組織或人組織移入冰浴預冷的研缽中，快速用力展研成勻漿。
注)下列組織請加液氮研磨至粉末狀。
A.富含DNA酶的胰臟、脾臟、胸腺、淋巴等組織。
B.富含膠原蛋白的皮膚、肌腱等組織。
C.富含角質蛋白的組織或堅硬的組織(如骨骼)等。
②加入650μl的Solution A和0.9μl的RNase A1，溫和研磨30秒鐘。
注)使用上述①-注)的實驗材料時，請在加入Solution A及RNase A1后，將研缽置于65℃水浴上研磨1分鐘。
③收集650μl研磨好的組織勻漿液移至Collection Tube中。如果勻漿體積不足650μl，請補充Solution A至650μl，65℃保溫5分鐘。
使用研磨棒進行勻漿時:
①取1~100 mg的動物組織或人組織移入冰浴預冷的Collection Tube中，用研磨棒快速研磨成糊狀。
②加入350μl的Solution A和0.9μl的RNase A1后用研磨棒快速研磨成勻漿。
③加入350μl的Solution A將研磨棒上的勻漿沖入Collection Tube中，充分振蕩混合后，65℃保溫5分鐘。
|
|||||
|
|||||
 |
